智能細胞株篩選系統(tǒng)有什么好處?
點擊次數(shù):885 更新時間:2023-01-18
智能細胞株篩選系統(tǒng)主要是用來篩選那些不表達特定蛋白的細胞株,這個系統(tǒng)需要專門的培養(yǎng)皿,在使用中如果沒有合適的培養(yǎng)液,培養(yǎng)過程就會出現(xiàn)很多的問題。我們可以用液氮作為培養(yǎng)液,但是液氮需要冷凍,保存溫度不能太低也不能太高。如果使用-80度左右就可以了。
將培養(yǎng)中的單個或多個細胞懸浮于無菌液體中形成懸浮液,加入生長因子和抗菌藥物后進行培養(yǎng)。待生長因子濃度達到一定程度后,我們將其進行離心分離。然后在液氮中進行冷凍干燥后保存:(-80度)-30min使用智能細胞株篩選系統(tǒng)來篩選細胞株。其中一些細胞株可以在培養(yǎng)液中穩(wěn)定生長過一年!
1、用于誘導(dǎo)表達:將經(jīng)過誘導(dǎo)的細胞用含有藥物的培養(yǎng)液和含有其它不同類型藥物的培養(yǎng)液連續(xù)培養(yǎng)7天以上,然后收集所有細胞進行計數(shù)(以單克隆或群體計數(shù))。
2、用于分泌蛋白篩選:將通過誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得的可在血清中穩(wěn)定表達目的蛋白或mRNA的細胞分離提取純化得到抗體后分離,然后用含有抗菌藥物L(fēng)-巖藻糖苷酸(LTA)和其它各種不同抗菌藥物成分濃度為500μg/ml、30000μg/ml和30000nM的處理后進行離心得到粗蛋白(>20kDa)后離心提取總蛋白表達分析,篩選可表達目的蛋白或mRNA。